Kultura e Indeve të Bimës së Kanabisit: Çfarë është ajo?

• 1. Historia e kulturës së indeve
• 2. Themeloret e kulturës së indeve
• 3. Çfarë është kultura e indeve të bimës dhe si funksionon?
• 4. Kultura e indeve vs klonimi
• 4. a. Klonimi
• 4. b. Kultura e indeve të bimës
• 5. 5 hapat e kulturës së indeve
• 5. a. Si të bëni kulturën e indeve të bimës në shtëpi
• 5. b. Udhëzues për përbërjen kimike
• 6. Përfundim

Kultura e indeve konsiston në marrjen e indeve të gjalla nga një bimë dhe rritjen e këtyre indeve në një bimë të plotë në kushte sterile. Ky proces daton që nga 1885 dhe është relativisht i ri për farat e kanabisit, por është shumë efektiv dhe mund të përdoret me shumicën e llojeve të bimëve. Procesi i kulturës së indeve rezulton në një burim të stabilizuar të indit të bimës të cilin teknikët mund ta ruajnë përmes shumëzimit të qelizave të bimëve. Duke e mbajtur këtë germplazmë në ambiente të pastra dhe të sigurta, ata janë në gjendje të ruajnë dhe të shumojnë vazhdimisht kultivarë dhe fenotipe të veçanta të bimës. Kjo teknikë ndihmon për të ruajtur bimët e rralla, ose për të mbajtur të gjalla fenotipe prodhuese dhe potente për t’u përdorur në fushë pas shumëzimit të tyre. Mund ta shihni kulturën e indeve si "banka" të gjeneve që mbahen në kushte të veçanta derisa të kërkohet të transplantohet në enë ose në tokë jashtë.

1. Historia e Kulturës së Indeve

Historia e kulturës së indeve daton që nga 1885 kur një zoolog gjerman tentoi të kultivonte inde nga embrioni i një pule, por nuk ishte deri në 1907 kur një zoolog amerikan kultivoi me sukses një qelizë nervore të bretkosës.

Më vonë, në 1910 një kirurg francez përmirësoi këtë teknikë dhe përkufizoi se çfarë ishte kultura e indeve, pasi teknika u përcaktua dhe u vendos, disa eksperimente të tjera patën sukses dhe lejuan studiues të tjerë të rrisnin qeliza burimore në kushte artificiale, që çuan në më shumë dije mbi biologjinë njerëzore dhe përparime të mëdha në mjekësinë rigjeneruese. Por, ndoshta po pyesni veten Si lidhet kjo me kanabisin?

2. Themeloret e Kulturës së Indeve

Pra, përpara se të thellohemi më shumë në kulturën e indeve, si funksionon dhe ndryshimet mes kulturës së indeve dhe klonimit, le të mësojmë për bazat e kulturës së indeve.

Kërkimi

Pra, nëse po provoni kulturën e indeve në shtëpi, gjëja e parë është të kërkoni nëse është bërë me sukses me atë varietet të caktuar në mënyrë që të ndiqni të njëjtin procedurë dhe ndoshta ta përdorni si udhëzues për të ditur çfarë të bëni ose çfarë të mos bëni.

Indi i bimës

Tani që dini çfarë të ndiqni, hapi tjetër është të merrni bimën që dëshironi të përdorni për procesin e kulturës së indeve. Bima donatore duhet të jetë 100% e shëndetshme dhe pa sëmundje. Gjithashtu, pjesa e bimës që përdorni varet nga bima, prandaj sigurohuni të ndiqni udhëzimet e përmendura më lart për të rritur shanset për sukses. Kini parasysh që ky proces varet nga një ambient i pastër, prandaj sigurohuni që gjithçka është e pastër dhe e sterilizuar, përfshirë rrobat tuaja, materialet dhe vetë dhomën sepse kontaminimi është arsyeja numër një për dështim.

Ajri

Hapi tjetër është ajri pasi bimët do të kenë nevojë për ajër të pastër, kështu që për të siguruar ajër të pastër mund të blini një kuti dore të improvizuar ose të bëni një të tillë vetë duke përdorur një akuarium të vjetër dhe tuba PVC, për shembull.

Mediumi

Njeri nga pjesët më të rëndësishme të kulturës së indeve është mediumi pasi aty do të vendoset bima pasi të jetë rritur mjaftueshëm. Mediumi duhet të jetë një substancë në formë xheli që ofron stabilitet dhe mbështetje për zhvillimin e rrënjëve dhe rritjen e bimës, dhe lëndë ushqyese për të prodhuar energji për rritje, kjo është arsyeja pse një nga mediumet më të njohura është Agari.

Tani që keni një ide më të qartë për atë që ju duhet, lexoni më tej për të kuptuar si të përdorni kulturën e indeve për bimët e kanabisit dhe llojet e tjera të bimëve. Vetëm mbani mend se kultura e indeve mund të jetë e vështirë nëse nuk keni materialin dhe pajisjet e duhura, por nuk keni pse të shqetësoheni. Gjithmonë mund t’i klononi bimët tuaja; Edhe pse numri i kloneve varet nga numri i degëve që rrit bima juaj, është shumë më e lehtë dhe nuk kërkon shumë përvojë. Gjithçka që ju nevojitet është xheli i klonimit dhe gërshërë, dhe kaq!

3. Çfarë është Kultura e Indeve të Bimës dhe Si Funksionon? 

Kultura e indeve është pikërisht ajo që u shpjegua më lart, pra, marrja e disa copëzave të indit të bimës ose qelizave dhe zhvillimi i qindra apo edhe mijëra kloneve identike prej tyre, kjo metodë i lejon kultivuesit të ruajnë një varietet për pothuajse përjetë, duke kërkuar shumë pak hapësirë dhe përpjekje. Ashtu si klonimi i zakonshëm, kultura e indeve fillon duke marrë një pjesë të vogël të bimës që dëshiron të klonosh; ndryshe nga klonimi klasik, ky mostër indi pritet, sterilizohet, dhe pasi është pastruar vendoset në një medium ushqyes që përmban jo vetëm lëndë ushqyese, por edhe hormone dhe sheqerna.

Kjo kulturë ushqyese është e ndryshme dhe përshtatet për çdo kulturë të indeve pasi disa lëndë ushqyese dhe hormone nxisin faza të caktuara të zhvillimit, kështu që nëse dëshironi të nxisni rritjen, zhvillimin e rrënjëve ose shumëzimin (kur bima është mjaftueshëm e madhe), duhet të siguroni mediumin e duhur ushqyes për zhvillimin që kërkoni. Pra, në thelb ju do të keni një copë ind dhe sapo të jetë mjaftueshëm i madh, mund ta ndani në qindra copëza për të klonuar veçmas, nëse dëshironi; sapo këto inde të jenë të gatshme të rriten, do t’i ushqehen me medium ushqyes që i inkurajon të rrënjëzojnë dhe më pas të rriten.

4. Kultura e Indeve vs Klonimi

Ndërsa industria e kanabisit evoluon, kultivuesit komercialë kërkojnë mënyra më të mira për të marrë më shumë rendiment dhe forcë në më pak kohë. Kur është e mundur, kultivuesit po kalojnë nga klonimi te kultura e indeve – por pse?

Klonimi 

Siç mund ta dini tashmë, klonimi konsiston në marrjen e prerjeve nga një bimë dhe pritjen deri sa ato të zhvillojnë rrënjë që të mund të rriten, ky klon do të bëhet një kopje e saktë e nënës së vet.

Por klonet mund të jenë jo të qëndrueshme si fidanë pasi është mjaft e vështirë të kesh një shkallë të mirë mbijetese dhe jo vetëm kaq, ato janë të ndjeshme ndaj dëmtuesve, infeksioneve, sëmundjeve dhe me kalimin e brezave, gjithmonë e më lehtë ndodhin mutacione gjenetike. Tani me kulturën e indeve, është ndryshe.

Kultura e indeve të bimës

Procesi i kulturës së indeve është relativisht i thjeshtë, por kërkon shumë kontroll për të siguruar kushtet e duhura, laboratorët e kulturës së indeve kërkojnë:

Sterilizimi

Kulturat e indeve kërkojnë një ambient ideal për rritjen e bimëve, kështu që ky ambient duhet të japë gjithçka ka nevojë një bimë në një formë që absorbohet lehtë por kjo ambient është gjithashtu i përshtatshëm për baktere dhe mikroorganizma të dëmshëm, prandaj gjithçka duhet të jetë e sterilizuar. Ky sterilizim është thelbësor sepse kërpudhat apo bakteret mund të vrasin bimët tuaja, prandaj jo vetëm laboratori duhet të jetë i sterilizuar por edhe mjetet, pajisjet dhe gjithashtu indi i bimës (i quajtur edhe "eksplant").

Ambienti aseptik  

Është jetike që i gjithë procesi të kryhet në një ambient plotësisht steril, prandaj, në kushte ideale, krijohet një dhomë e veçantë që ju të mund të prekni pajisjet që janë tashmë sterile. Ky ambient i veçantë përdoret sa herë që ju duhet të ekspozoni diçka si mjetet, pajisjet apo indin në ajër.

Sëmundjet mund të hyjnë lehtësisht në hapësirat e punës; sporet e kërpudhave janë gjithmonë të pranishme në ajër. Për të parandaluar kontaminimin e bimëve in vitro (atyre që rriten në xham si pjatat Petri), teknikët shpesh punojnë para ose nën kapuç të rrjedhës së ajrit. Këto pajisje përdorin ventilatorë për të fryrë ajrin përmes filtrit HEPA—një pajisje në gjendje të filtrojë ndotës shumë të vegjël nga ajri, siç janë viruset, bakteret dhe sporet e kërpudhave. Ajri i pastër fryn mbi hapësirën e punës në rrjedhë laminare, që parandalon që grimcat të bien poshtë mbi pjatat e hapura Petri.

Medium special për rritje

Me kulturën e indeve të bimës, krijohet një medium steril për të siguruar lëndë ushqyese, sheqer, ujë dhe vend për rritje, ky medium i ofron gjithçka që bimët tuaja kanë nevojë për të mbijetuar derisa të bëhet një bimë e plotë. Ky medium mund të bëhet në shtëpi me pluhur të gatshëm, sheqer dhe ujë të distiluar pH 5.8; kështu që megjithëse është relativisht e thjeshtë, kërkon shumë masa sigurie.

5. 5 Hapat e Kulturës së Indeve

Këtu janë 5 hapat e thjeshtë të kulturës së indeve të bimëve në laborator, vetëm mbani në mend se ky është një përmbledhje e të gjithë procesit.

1. Zgjidh bimën që do të përdorësh;
2. Vendos indin në ambient steril, hiq një copë, pastroje dhe lëre të rritet në mediumin e duhur;
3. Siguro kushte të përshtatshme dhe lëre indin të shumëzohet (zakonisht zgjat 14 ditë);
4. Ndize rritjen e rrënjëve te bima;
5. Transplanto në enën përfundimtare dhe lëre të rritet.

Tani, nëse dëshironi një udhëzim më të detajuar hap pas hapi dhe si ta bëni në shtëpi, këtu është një udhëzues, mbani mend që do ju duhen mjete të shtrenjta, prandaj edhe pse është DIY, ju nevojitet pajisje speciale.

Si të bëni kulturën e indeve të bimës në shtëpi

Nëse jeni të interesuar për një udhëzues sesi të bëni kulturën e indeve të bimës me kanabis, këtu është një udhëzim i detajuar hap pas hapi, siç u përmend më sipër, do ju duhet pajisje speciale por është krejtësisht e mundur ta bëni në shtëpi.

Faza e fillimit (1-2 javë)

Hapi 1

Ndezni kapuçin e rrjedhës së ajrit dhe lëreni të punojë për të paktën 30min para se të filloni, nëse nuk keni kapuç rrjedhe laminare, përdorni një djegës/lampë alkooli dhe punoni afër flakës.

Hapi 2

Sterilizoni kapuçin e rrjedhës me 70% etanol por mos e spërkatni direkt në filtër.

Hapi 3

Ndez sterilizuesin dhe lerë të nxehet për 20min.

Hapi 4

Sterilizoni një pako letre në cikël të thatë, pastaj sterilizoni enët, ujin dhe twenin në cikël të ngadaltë.

Hapi 5

Pastaj përgatitni mediumin, merrni një enë, mbusheni me ujë të osmozës së kundërt, ujë të distiluar ose ujë të dejonizuar (ideal). Nëse po bëni 1L medium, shtoni 900ml ujë. Pasi keni ujë gati, shtoni lëndë ushqyese Grow deri të arrini EC 1.5, pastaj shtoni 30g/L sheqer dhe rregulloni pH në 5.7, pastaj shtoni 6g/L agar dhe vendoseni në një shishe të autoclavueshme por MOS e tejmbushni. Sterilizoni shishen për 15min dhe pastaj derdhni rreth 50ml në çdo enë të sterilizuar që do të përdorni.

Hapi 6

Tani që mediumi është gati, përgatitni një tretësirë me 0.5% zbardhues dhe 0.1% tween steril 20, nëse keni vetëm zbardhues 2.75%, shtoni 181ml për 1L.

Hapi 7

Mbushni një enë me pak ujë, merrni materialin tuaj të kanabisit dhe vendoseni në ujë; sigurohuni që materiali bimor është i shëndetshëm. Nëse do ta ruani materialin bimor për më tepër se 1 orë, vendoseni në një ftohës me akull dhe përpiquni ta fusni në ujë sa më shpejt.

Hapi 8

Merrni një enë të mbyllshme të sterilizuar dhe mbusheni rreth 80% me tretësirën zbardhues/tween, pastaj shtoni materialin bimor dhe mbylleni.

Hapi 9

Tundni lehtë për 20 min dhe pastaj tundni fuqishëm për 20 sekonda pas 20 minutave të para.

Hapi 10

Transferoni materialin bimor në një enë tjetër të mbushur me 80% ujë të sterilizuar dhe tundni lehtë për 5 minuta dhe përsëriteni dhe 2 herë të tjera.

Hapi 11

Përdorni pinceta sterile për të transferuar materialin bimor në letër të sterilizuar që të thithë ujin e tepërt dhe pastaj vendosni një pjesë materiali bimor për enë. Bima duhet të qëndrojë në pozicion vertikal në enë dhe pastaj vendoset në një raft në 25°C nën një cikël drite 18/6 për të paktën 3 javë. Pasi bimët tuaja janë gati, do të rritni me sukses një klon dhe tashmë është gati për t'u rritur në mediumin tuaj të preferuar, qoftë jashtë ose brenda.

Udhëzues për Përbërjen Kimike 

Kini parasysh se ka lloje të ndryshme mediumesh, mineralet dhe sasia mund të ndryshojnë sipas mediumit që përdorni, ky udhëzues është shkruar duke përdorur mediumin Murashige-Skoog si shembull, prandaj sigurohuni të lexoni dhe të zbuloni përbërësit dhe sasinë e rekomanduar për mediumin tuaj.

Këto janë lëndët ushqyese thelbësore që bimët tuaja të kanabisit kanë nevojë në sasi të larta dhe janë thelbësore në kulturën e indeve, pa to bimët tuaja nuk do të mund të rrisin masë jeshile.

Këto janë lëndët ushqyese thelbësore që bimët tuaja të kanabisit kanë nevojë në sasi më të vogla por janë gjithashtu thelbësore në kulturën e indeve; pa to, bimët tuaja nuk do të rriten siç duhet dhe patjetër do të shfaqin shenja mungesash.

Këto vitamina janë thelbësore për të ndihmuar metabolizmin e bimëve tuaja, sidomos kur flasim për kulturën e indeve, prandaj sigurohuni t’i siguroni në sasinë e duhur.

6. Përfundim

Kultura e indeve të kanabisit mund të duket disi e vështirë, por është relativisht e thjeshtë, duhet vetëm të siguroheni që po ruani kushtet më të mira dhe të merrni gjithmonë masat e duhura të sigurisë për të siguruar normën më të lartë të mbijetesës. Ne e dimë që kjo teknikë është relativisht e re dhe mund të jetë mjaft e shtrenjtë, prandaj jo të gjithë kultivuesit kanë qasje në pajisjet e nevojshme, por nëse punoni ose keni bërë laboratorin tuaj të kulturës së indeve në shtëpi, ndajeni dijen tuaj me kultivuesit e tjerë, lërini një koment poshtë!

Referenca të jashtme

1. Kulturat e Indeve Bimore. - Kärkönen, Anna & Santanen, Arja & Iwamoto, Kuninori & Fukuda, Hiroo. (2020). 
2. Nanoteknologjia dhe Kultura e Indeve të Bimëve. - Tariq, Amina & Ilyas, Saiqa & Naz, Shagufta. (2020). 
3. Mediat e Kulturës së Indeve të Bimëve, Përparime të Fundit në Kulturën In Vitro. - Annarita Leva dhe Laura M. R. Rinaldi (2012).