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Cultivo de tejidos de plantas de cannabis: ¿Qué es?

¿En qué se diferencia el cultivo de tejidos de la clonación y qué es?
19 September 2022
9 min read
Cultivo de tejidos de plantas de cannabis: ¿Qué es?

Contenido:
  • 1. Historia del cultivo de tejidos
  • 2. Los fundamentos del cultivo de tejidos
  • 2. a. Investigación
  • 2. b. Tejido vegetal
  • 2. c. Aire
  • 2. d. El medio
  • 3. ¿qué es el cultivo de tejidos vegetales y cómo funciona?
  • 4. Cultivo de tejidos vs. clonación
  • 4. a. Clonación
  • 4. b. Cultivo de tejidos vegetales
  • 5. Los 5 pasos del cultivo de tejidos
  • 5. a. Cómo plantar cultivos de tejidos en casa
  • 5. b. Guía de composición química
  • 6. En conclusión

El cultivo de tejidos consiste en tomar tejido vivo de una planta y convertir ese tejido en una planta completa en condiciones estériles. Este proceso se remonta a 1885 y es relativamente nuevo en el cannabis, pero es muy eficaz y se puede utilizar con la mayoría de las especies de plantas.

1. Historia del cultivo de tejidos

La historia del cultivo de tejidos se remonta a 1885 cuando un zoólogo alemán intentó cultivar tejido de un embrión de pollo, pero no fue hasta 1907 cuando un zoólogo estadounidense cultivó con éxito una célula nerviosa de rana.

 

Cannabis plant tissue culture: history

El cultivo de tejidos lo intentó por primera vez un zoólogo alemán que intentó cultivar tejido de un embrión de pollo.
 

Más tarde, en 1910, un cirujano francés mejoró esta técnica y definió qué era el cultivo de tejidos, después de que se definió y estableció la técnica, varios otros experimentos tuvieron éxito y permitieron a otros investigadores cultivar células madre en condiciones artificiales que llevaron a un mayor conocimiento sobre la biología humana y gran progreso en la medicina regenerativa.

Pero, quizás te preguntes ¿Cómo se relaciona esto con el cannabis?

2. Los fundamentos del cultivo de tejidos

Antes de profundizar en el cultivo de tejidos, en su funcionamiento y en las diferencias entre el cultivo de tejidos y la clonación, conozcamos lo esencial del cultivo de tejidos.

Investigación

Si vas a intentar hacer un cultivo de tejidos en casa, lo primero es investigar si se ha hecho con éxito con esa cepa concreta para poder seguir el mismo procedimiento y quizás utilizarlo como guía para saber qué hacer o qué no hacer.

Tejido vegetal

Ahora que sabes lo que debes seguir, lo siguiente es conseguir la planta que quieres utilizar para el proceso de cultivo de tejidos. La planta donante debe estar 100 % sana y sin enfermedades. Además, la parte de la planta que utilices depende de cada planta, así que asegúrate de seguir las pautas mencionadas anteriormente para aumentar las posibilidades de éxito. Ten en cuenta que este proceso depende de un entorno limpio, así que asegúrate de que todo esté limpio y esterilizado, incluida tu ropa, los materiales y la propia sala, porque la contaminación es la razón número uno del fracaso.

Aire

Lo siguiente es el aire, ya que las plantas necesitarán aire limpio, así que para asegurarte de que el aire está limpio puedes comprar una caja de guantes improvisada o hacer la tuya propia utilizando una vieja pecera y tubos de PVC, por ejemplo.

El medio

Una de las partes más importantes del cultivo de tejidos es el medio, ya que es donde se colocará la planta una vez que sea lo suficientemente grande. El medio debe ser una sustancia gelatinosa que proporcione estabilidad y apoyo para el desarrollo de las raíces y el crecimiento de la planta, y nutrientes para que la planta produzca energía para crecer, por eso uno de los medios más populares es el Agar.
 
Ahora que ya tienes una idea más clara de lo que necesitas, sigue leyendo para entender cómo cultivar tejidos de plantas de cannabis y de todo tipo de plantas. Recuerda que el cultivo de tejidos puede ser difícil si no tienes el material y el equipo adecuados, pero no hay por qué preocuparse. Siempre puedes clonar tus plantas; aunque el número de clones depende del número de ramas que crezca tu planta, es mucho, mucho más fácil y no requiere mucha experiencia. Todo lo que necesitas es gel de clonación y tijeras, ¡y ya está!

3. ¿Qué es el cultivo de tejidos vegetales y cómo funciona?

El cultivo de tejidos es exactamente lo que se explicó anteriormente, así que básicamente, obteniendo solo unos pocos trozos de tejido o células vegetales y desarrollando cientos o incluso miles de clones idénticos a partir de ellos, este método permite a los cultivadores preservar una determinada cepa casi para siempre mientras necesitan un espacio mínimo y esfuerzo.

Como clonación regular, el cultivo de tejidos comienza con una pequeña parte de la planta que desea clonar, a diferencia de la clonación regular, esta muestra de tejido se recorta, se esteriliza y, una vez que se limpia, pasa a un cultivo de nutrientes que no solo contiene nutrientes sino también hormonas y azúcares.

 

Cannabis plant tissue culture: what is it?

A diferencia de la clonación, el cultivo de tejidos se puede realizar con unas pocas células vegetales.
 

Este cultivo de nutrientes depende y está diseñado básicamente para cada cultivo de tejidos porque algunos nutrientes y hormonas desencadenarán ciertas etapas de desarrollo, por lo que si deseas desencadenar el crecimiento, el desarrollo de raíces y/o la multiplicación (cuando la planta es lo suficientemente grande para hacerlo) tendrás que proporcionar un cultivo de nutrientes específico para el desarrollo que deseas.

Así que, básicamente, tendrías un trozo de tejido y una vez que sea lo suficientemente grande, se puede cortar en cientos de trozos para clonarlos por separado, si eso es lo que deseas hacer, una vez que estos tejidos sean lo suficientemente grandes para crecer, se les alimentará con un cultivo de nutrientes que los animará a enraizar y luego a crecer.

4. Cultivo de tejidos vs. clonación

A medida que la industria del cannabis evoluciona, los cultivadores comerciales buscan la mejor manera de obtener más rendimiento y potencia en menos tiempo. Cuando es posible, los productores están cambiando de la clonación al cultivo de tejidos, pero ¿por qué?

Clonación

Como ya sabrás, la clonación consiste en tomar esquejes de una planta y esperar a que haya desarrollado raíces para poder cultivarla, este clon se convertirá en una copia exacta de su madre.

 

Cannabis plant tissue culture: cloning vs tissue culture

Clonación vs. cultivo de tejidos.
 

Pero los clones pueden ser poco confiables como plántulas porque puede ser bastante difícil tener una buena tasa de supervivencia y no solo esto, son susceptibles a plagas, infecciones, enfermedades y, a medida que pasan las generaciones, es más y más fácil contraer mutaciones genéticas.

Ahora, con el cultivo de tejidos, es bastante diferente. 

 


Cultivo de tejidos vs. clonación
Cultivo de tejidosClonación
Más caro que las semillas y los clones.Menos caro que las semillas.
Mayor tasa de supervivencia si se realiza correctamente.Tasa de supervivencia más baja.
Puede obtener cientos o incluso miles de clones de una sola hoja.Puede obtener cientos de clones de una sola planta.

 

Cultivo de tejidos vegetales

El proceso de cultivo de tejidos es relativamente simple, pero requiere mucho control para garantizar que se mantengan las condiciones adecuadas, los laboratorios de cultivo de tejidos necesitan:

Esterilización

Los cultivos de tejidos requieren un entorno ideal para que las plantas crezcan, por lo que este entorno debe ofrecer todo lo que una planta necesita en una forma que sea fácil de absorber, pero ese entorno también es ideal para bacterias y microorganismos dañinos, por lo que todo debe esterilizarse. Esta esterilización es vital porque los hongos o las bacterias pueden terminar matando sus plantas, por lo que no solo se debe esterilizar el laboratorio, sino también las herramientas, el equipo y también el tejido de la planta (también conocido como "explante"). 

 

Cannabis plant tissue culture: cloning vs tissue culture

Al igual que con el corte, el cultivo de tejidos requiere ciertas condiciones que deben seguirse estrictamente.
 

Ambiente aséptico

Es vital tener el proceso completo en un ambiente completamente estéril, por lo que, en condiciones ideales, se crea una cámara especial para que puedas tocar el equipo que ya está esterilizado. Este entorno especial se utiliza cada vez que necesita exponer al aire algo, como herramientas, equipos o pañuelos.

Medio de cultivo especial

Con el cultivo de tejidos vegetales, se hace un medio estéril para proporcionar a la planta nutrientes, azúcar, agua y un lugar para crecer, este medio proporciona todo lo que tus plantas necesitan para sobrevivir hasta que se convierta en una planta completa.

Este medio se puede preparar en casa con un polvo prefabricado, azúcar y agua destilada con un pH de 5.8, por lo que, aunque es relativamente simple, requiere muchas medidas de seguridad.

 

Los pros y los contras del cultivo de tejidos
ProsContras
Las plantas se pueden cultivar en poco tiempo.Requiere más trabajo y dinero.
Solo se necesita una pequeña cantidad de tejido.Menos resistente debido al ambiente estéril.
Es más probable que las nuevas plantas estén libres de enfermedades.El tejido debe revisarse minuciosamente para detectar anomalías.

 

5. Los 5 pasos del cultivo de tejidos

Aquí están los 5 sencillos pasos del cultivo de tejidos vegetales en un laboratorio, solo ten en cuenta que este es un resumen de todo el proceso.

  1. Selecciona la planta que desea utilizar;
  2. Coloca el pañuelo en el ambiente estéril, retira un trozo, límpialo y déjalo crecer en el medio adecuado;
  3. Asegura las condiciones adecuadas y deja que el tejido se multiplique (normalmente tarda 14 días);
  4. Fuerza a la planta a enraizar;
  5. Trasplanta al recipiente final y deja crecer.

Ahora, si deseas un paso a paso más detallado y cómo hacerlo en casa, aquí hay una guía, solo ten en cuenta que necesitarás herramientas costosas, por lo que, aunque sea de bricolaje, necesita un equipo especial.

Cómo plantar cultivos de tejidos en casa

Si estás interesado en una guía sobre cómo hacer un cultivo de tejidos vegetales con cannabis, aquí hay un paso a paso detallado, como se dijo anteriormente, vas a necesitar un equipo especial, pero es totalmente posible hacerlo en casa.

Fase de iniciación (1-2 semanas)

Paso 1

Enciende la campana de flujo y déjala funcionar durante al menos 30 minutos antes de comenzar, si no tienes una campana de flujo laminar, usa un quemador/lámpara de alcohol y trabaja cerca de la llama.

 

Cannabis plant tissue culture: step-by-step guide

Asegúrate de esterilizar todo antes de comenzar.
 

Paso 2

Esteriliza la campana de flujo con etanol al 70 %, pero no lo rocíes directamente sobre el filtro.

Paso 3

Enciende tu esterilizador y deja que se caliente durante 20 minutos.

Paso 4

Esteriliza un paquete de papel en un ciclo seco, luego esteriliza los recipientes, el agua y la interpolación en un ciclo lento.

Paso 5

Luego para preparar el medio, conseguir un recipiente, llenarlo con ósmosis inversa, agua destilada o agua desionizada (ideal). Si estás haciendo 1 litro de medio, agrega 900 ml de agua.

Una vez que tengas el agua lista, agrega los nutrientes Grow hasta que alcance una CE de 1.5, luego agrega 30 g/L de azúcar y ajuste el pH de la solución a 5.7, luego agregue 6 g/L de agar y colócalo en una botella autoclavable, pero NO lo desbordes.

Deja correr la botella en el esterilizador durante 15 minutos y luego vierte alrededor de 50 ml en cada recipiente esterilizado que usará.

Paso 6

Ahora que tienes el medio listo, prepara una solución con lejía al 0,5 % y 20 estéril Interpolación al 0,1 %, si solo tienes lejía al 2,75 %, agrega 181 ml por 1 L.

 

Cannabis plant tissue culture: step-by-step guide

Asegúrate de que incluso el material vegetal esté esterilizado antes de comenzar el proceso.
 

Paso 7

Llena un recipiente con una pequeña cantidad de agua, toma tu material de cannabis y colócalo en agua. Asegúrate de que el material vegetal esté sano. Si vas a almacenar el material vegetal durante más de 1 hora, colócalo en una hielera con hielo e intenta ponerlo en agua lo antes posible.

Paso 8

Obtén un recipiente esterilizado sellable y llénalo aproximadamente al 80 % con la solución de lejía/interpolación, luego agrega el material vegetal y séllalo.

Paso 9

Agita suavemente durante 20 minutos y luego agita vigorosamente durante 20 segundos después de los 20 minutos iniciales.

Paso 10

Transfiere el material vegetal a otro recipiente lleno con agua esterilizada al 80 % y agita suavemente durante 5 minutos y repítelo 2 veces más.

 

Cannabis plant tissue culture: step-by-step guide

Una vez hecho todo, deberás colocar los explantes en un recipiente y dejarlos crecer durante un mínimo de 3 semanas.
 

Paso 11

Usa pinzas estériles para transferir el material vegetal a una hoja de papel estéril para absorber el exceso de agua y luego coloca una pieza de material vegetal por recipiente. La planta debe estar en posición vertical en el recipiente y luego colocarse en una rejilla a 2 °C bajo un ciclo de luz 18/6 durante al menos 3 semanas. Una vez que sus plantas estén listas, cultivará con éxito un clon y ahora estará listo para ser cultivado en el medio que elija, ya sea en exteriores o en interiores.

GUÍA DE COMPOSICIÓN QUÍMICA 

Ten en cuenta que hay diferentes tipos de medios, los minerales y la cantidad pueden cambiar según el tipo de medio que utilices, esta guía se ha escrito utilizando el medio de Murashige-Skoog como ejemplo, así que asegúrate de leer y averiguar qué ingredientes y la cantidad que se prefiere en el medio que estás utilizando.

 

MACRONUTRIENTES
Nitrógeno inorgánico25000-60000 µmol/L
Potasio20000-30000 µmol/L
Fósforo, Magnesio, Azufre y Calcio1000-3000 µmol/L

 

Estos son los nutrientes esenciales que tus plantas de cannabis necesitan en grandes cantidades y son esenciales en el cultivo de tejidos, sin ellos tus plantas no podrán crecer con materia verde.

 

 

Vitaminas
Tiamina0.1-10 mg/LPiridoxina0.1-10 mg/L
Ácido nicotínico0.1-5 mg/LMyo-inositol50-500 mg/L

 

Estas vitaminas son esenciales para ayudar al metabolismo de tu planta, sobre todo cuando se trata del cultivo de tejidos, así que asegúrate de proporcionarlas y en las cantidades adecuadas.

 

 

Aminoácidos
Hidrolizado de caseína0.25-1 g/LAsparragina100 mg/L
Glicina2 g/LL-Arginina10 mg/L
Glutamina8000 µmol/LL-Tirosina10 mg/L

 

7. En Conclusión

El cultivo de tejidos de cannabis puede parecer bastante difícil, pero es relativamente sencillo, sólo tienes que asegurarte de mantener las mejores condiciones y tomar todas las precauciones de seguridad para garantizar la mayor tasa de supervivencia. Sabemos que esta técnica es relativamente nueva y puede ser bastante cara, por lo que no todos los cultivadores pueden tener acceso al equipo necesario.  Por favor, comparte tus conocimientos con otros cultivadores, ¡deja un mensaje en la sección de comentarios de abajo!

 

Referencias externas

  1. Plant Tissue Cultures. - Kärkönen, Anna & Santanen, Arja & Iwamoto, Kuninori & Fukuda, Hiroo. (2020). 
  2. Nanotechnology and Plant Tissue Culture. - Tariq, Amina & Ilyas, Saiqa & Naz, Shagufta. (2020). 
19 September 2022